ARTICULO PARA COLEGAS

Determinaciones moleculares y serológicas en el diagnóstico y seguimiento de infección por SARS-CoV-2

La aparición y rápida propagación del virus SARS-CoV-2 ha acelerado el desarrollo y puesta en marcha a nivel mundial de los métodos de laboratorio para diagnóstico y seguimiento epidemiológico en tiempos sin precedentes. En pocos días se encontraba disponible la secuencia del genoma viral y con éste el diseño de primers específicos para diagnosticar por RT-PCR. Pocos meses después ya contamos con test serológicos complementarios para poder evaluar seroconversión en pacientes. Todo esto aún sin terminar de comprender mucho acerca de la enfermedad, con grandes incógnitas a nivel fisiopatológico e inmunológico, lo que dificulta protocolos de tratamiento y de desarrollo de vacunas. En pocas palabras, hemos desarrollado la parte práctica sin tener la teoría comprendida.

Enfocándonos exclusivamente en el laboratorio específico de SARS-CoV-2 tenemos dos herramientas como son la detección de antígeno (ARN viral) y la determinación de anticuerpos que pueden utilizarse en forma conjunta.

La PCR debido a su sensibilidad es la técnica de elección para el diagnóstico en el período de inicio de lo síntomas. La presencia de ARN viral se observa en hasta el 50% de los pacientes 20 días luego de iniciados los síntomas y se han documentado, aunque con valores más bajos de carga viral, hasta el día 30. Además de ello, la PCR se utiliza con el fin de dar de alta pacientes luego de dos resultados negativos obtenidos con 48 hs de diferencia, asegurando que la descarga viral y por tanto la infecciosidad del paciente es nula. Una vez que el paciente se encuentra en período de convalecencia la técnica carece de utilidad.

Al día de hoy la detección de anticuerpos tiene tres utilidades a saber: seguimiento en la evolución de la respuesta inmune en pacientes diagnosticados tempranamente por PCR; detección de convalecientes que han tenido síntomas leves o han cursado la enfermedad en forma asintomática y por lo cual no han sido testeados por PCR en el período de descarga viral; fines epidemiológicos para conocer la prevalencia de la enfermedad en la población. El buen uso de los anticuerpos permitiría evaluar si las medidas no farmacológicas tomadas, como lavado de manos, distanciamiento social, restricciones laborales, concurrencia a establecimientos escolares y demás, están cumpliendo su objetivo o deben reevaluarse.

La cinética de seroconversión es variable. Generalmente hay una aparición de IgM (5 a 7 días posteriores al inicio de los síntomas) con posterior aparición de IgG (12 a 14 días) pero también hay casos, aunque en menor cantidad, de aparición simultánea de ambas clases de inmunoglobulinas e incluso respuesta más temprana de IgG que IgM. Se acepta que el 100% de los pacientes habrá generado una respuesta de anticuerpos alrededor de los 20 días. La recuperación de COVID-19 podría conferir inmunidad contra la reinfección, al menos en el corto plazo y aún se desconoce si la respuesta inmune desarrollada confiere inmunidad a largo plazo.

Bibliografía

• Lauer SA, et al. 2020 Annals of Internal Medicine:504.
• Bar-On et al. eLife 2020;9:e57309.
• Li R et al. Science 368:489-493.
• Li Q et al. New England Journal of Medicine 382:1199?1207.

Dr. Marcelo Pugliessi
Dto. Biología Molecular
IBC Instituto de Bioquímica Clínica

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